尊龙凯时提供的RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，因其易于培养与操作而受到广大科研工作者的青睐。然而，在培养过程中，细胞可能发生分化，造成形态变化、功能下降，甚至影响实验结果的可靠性。那么如何让RAW2647细胞“保持最佳状态”，保持其原始形态与功能呢？接下来，我们将解密RAW2647细胞培养的关键要点，助您轻松掌握这一细胞系的技巧。
1. 倍增时间： 11-30小时（细胞生长速度快，营养消耗迅速，建议在T25培养瓶中添加7ml完全培养基，并于次日观察生长情况）。
2. 传代比例： 1:4-6
3. 培养体系： DMEM高糖（品牌：中乔新舟货号：ZQ-100）+ 10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+ 1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）。
4. 细胞形态： 该巨噬细胞呈现松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形。当细胞密度较大时，细胞会轻微脱落变圆，或许多细胞堆叠在一起，部分细胞甚至游离在培养基中，需在传代时收集并离心以继续培养。
每周进行2-3次换液，以保持细胞的最佳生长状态。
正确的传代方式是RAW2647细胞培养的关键。需注意每一步操作，避免细胞分化。切勿使用胰酶消化，因其会促进细胞分化。本公司经过十多年经验，摸索出一种刮刀传代的方法，操作简便且能有效控制细胞分化率。
若没有刮刀，可按以下步骤进行传代以减少细胞分化：
1. 当细胞密度达到80%时，轻拍瓶尾部观察细胞脱落情况。
2. 拍打过程中，50-80%的细胞通常会脱落，此时收集这些脱落的细胞。
3. 按照1:4-6的比例传代，并补充新鲜完全培养基，T25瓶中加入7ml完全培养基。
4. 请勿使用枪头或巴氏吸管进行吹打，因为每个人的吹打力度不同，会引起无法控制的细胞分化。
1. 该细胞在传代时不需要胰酶消化，而应使用无菌刮刀轻轻刮拭培养表面以收集细胞，随后离心并重悬接种。
2. 细胞形态为松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形，细胞密度加大时，圆形细胞（巨噬细胞）数量将增多。
3. 细胞对血清质量非常敏感，应选用高品质的胎牛血清，以避免影响细胞的贴壁能力或引起分化。
4. 培养条件、运输及环境变化等都可能影响细胞状态，因此收到细胞后需适当调整和耐心培养。
5. 强烈建议使用尊龙凯时提供的培养基，以减少培养过程中的变因。
1. 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37°C水浴中解冻。
2. 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。
3. 以1000rpm离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬细胞（T25中添加7ml）。
4. 将细胞接种于培养皿中，置于37°C、5%CO₂的培养箱中培养。
通过以上步骤，您可以有效掌握RAW2647细胞的培养与传代技巧，确保细胞在尊龙凯时的培养体系中健康生长，达到理想的实验效果。