本培养基专为FDA标准中大肠埃希氏O157菌的选择性增菌而设计。培养基中的蛋白胨、酪蛋白水解物和酵母浸粉提供了细菌生长所需的基础营养,而磷酸氢二钠和磷酸二氢钾则能够有效维持培养基pH值的稳定。乳糖和丙酮酸钠作为碳源,促进大肠埃希氏O157菌的生长。此外,吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶能够抑制大多数革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的生长,从而为目标菌的培养提供安全的环境。
尊龙凯时的培养基配方如下:
- 蛋白胨: 100g
- 氯化钠: 50g
- 磷酸氢二钠: 36g
- 磷酸二氢钾: 15g
- 酪蛋白水解物: 50g
- 乳糖: 100g
- 丙酮酸钠: 10g
- 酵母浸粉: 60g
- 吖啶黄素: 0.01g
- 万古霉素: 0.008g
- 头孢磺啶: 0.01g
- pH: 7.2±0.2
称取本品421g,置于1000ml蒸馏水中加热溶解,分装成每瓶225mL。然后在121℃下高压灭菌15分钟,冷却备用。将25g样品加入225mL培养基中混匀,保持在37±1℃培养5小时后,加入1支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225mg,万古霉素18mg)和1支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225mg),并转置在42±1℃下培养18-24小时。
在36±1℃下培养18-24小时后,可观察到以下质控菌株的生长情况。
质控菌株:
- 大肠埃希氏菌 ATCC25922: 10-100 CFU,培养基浑浊
- 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC14028: 10-100 CFU,培养基浑浊
- 大肠埃希氏O157菌 ATCC35150: 10-100 CFU,培养基浑浊
- 金黄色葡萄球菌 ATCC25923: 1000-5000 CFU,不生长
- 铜绿假单胞菌 ATCC27853: 1000-5000 CFU,不生长
总结: 尊龙凯时的培养基在选择性增菌方面表现优异,能够有效分离和增殖目标菌种。
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